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紫外分光光度计的工作原理解析

时间:2016-11-11      阅读:593

  分光光度计是理化分析中zui常用的仪器。它的基本原理是建立在光与物质相互作用的基础上,当光子和某一溶液中吸收辐射的物质分子相碰撞时,就发生吸收,测量其吸光度值的大小可反映某种物质存在的量的多少。光的吸收程度与浓度有一定的比例关系,这就是的比直定律。该定律成立的必要条件是单色光(单一波长光)照射样品。为了使该定律具有良好的线性,对测量浓度有一定的范围要求。也就是吸光度值控制在0.2~0.7之间,并且要求单色光垂直照射样品,试样要均匀。一台性能优良的分光光度计,必须有一个高性能的光路系统即单色仪。单色仪有两类:一类是以玻璃三棱镜为色散元件组成,另一类是由光栅为色散元件组成。两种单色仪各有利弊,用石英玻璃做成的单色仪,在紫外光区有较高的色散率,波长精度较高,分辨率可达0.2nm,但在可见光区要大于2nm,波长精度不线性。
  
  紫外分光光度计和红外光谱仪相似,利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内,对于一个特定的波长,吸收的程度正比于试样中该成分的浓度,因此测量光谱可以进行定性分析,而且根据吸收与已知浓度的标样的比较,还能进行定量分析。
  
  目前大部分光栅或分光光度计所用的光栅都是复制光栅,波长精度不太高,如754、722、752型分光光度计,波长精度在±2nm。近几年出现了不少带单片机的分光光度计,数据处理和操作功能大大加强,但基本原理没有变。
  
  分光光度计是一种高阻仪器,所以怕潮湿,过高的空气湿度将影响仪器的稳定性和电安全性,环境湿度一般控制在<85%。温度对仪器也有一定影响,因仪器灯源本身具有热量。当工作一段时间后,仪器本身温度会增加,当环境温度过高时会严重影响仪器读数的稳定性和使用寿命。实验室的温度一般控制在10℃~25℃之间。在日常维护工作中要定期更换仪器的硅胶,定期开机,这样才能保证仪器的正常使用和测量数据稳定可靠。
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